中国科学家取得B族肠道病毒致病机制研究重大进展丨CellPress论文速递
2019年5月16日，中国科学院微生物研究所高福团队与北京大学魏文胜团队，首都医科大学附属北京儿童医院谢正德团队联合，在Cell Press细胞出版社旗下Cell（《细胞》）上发表了题为“Human neonatal Fc receptor is the cellular uncoating receptor for Enterovirus B”的文章。
该论文中，研究人员利用CRISPR筛选技术，发现人类新生儿Fc受体（human neonatal Fc receptor, FcRn）是多个B族肠道病毒的通用脱衣壳受体，并通过解析病毒与其吸附受体（attachment receptor）和脱衣壳受体（uncoating receptor）在不同pH条件下复合物的原子/近原子水平高分辨率电镜结构，从分子水平揭示了“双受体系统”中两种受体的不同作用机制，系统地阐明了肠道病毒感染宿主细胞的入侵机制。本研究在B族肠道病毒的致病研究和药物开发，非囊膜病毒的入侵机制研究方面均具有重要意义。
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B族肠道病毒（Enterovirus B ，EV-B）属于小RNA病毒科（Picornaviridae），肠道病毒属（Enterovirus）。包括埃可病毒（Echovirus），柯萨奇病毒B，柯萨奇病毒A9，以及多个新发现的B族肠道病毒血清型。 B族肠道病毒感染是常见的新生儿期感染性疾病病因之一，可导致新生儿和青少年病毒性脑炎，脑膜炎，脑膜脑炎等疾病，部分病例留有严重后遗症，严重时可致命。还可导致急性驰缓性瘫痪（AFP），非特异性皮疹，肝炎，肺炎，凝血障碍和手足口等疾病。2019年5月11日，广东省卫生健康委员会查办了一起发生在南方医科大学顺德医院的严重医疗事故，这是由肠道病毒（埃可病毒11型）导致的医院感染事件，造成了5例患有新生儿肺炎等基础疾病的患儿死亡。在我国，埃可等B族肠道病毒长期以来是很大一部分儿童脑炎，脑膜炎病例的致病病原，长期范围内在多个省份均有感染病例。此外，在世界范围的流行造成的公共卫生事件也均有报道。但是此前，除柯萨奇病毒B之外，埃可病毒等大多数B族肠道病毒的致病机制以及跨越血脑屏障机制尚不清楚，决定其感染细胞的关键受体尚未发现和报道。导致埃可等B族肠道病毒无特异性药物，无疫苗，无用于药物疫苗研发的动物模型。因此，研究团队进行了埃可等B族肠道病毒的受体和入侵机制相关研究。
FcRn是B族肠道病毒入侵的关键受体
研究人员选取其中致病性较强的血清型埃可病毒6型（Echo 6），通过CRISPR-Cas9膜蛋白基因组筛选技术，发现人类新生儿Fc受体是病毒入侵细胞的一个关键受体。新生儿Fc受体是由FCGRT基因表达的α链和β2-微球蛋白共同组成的异源二聚体，是一个重要的免疫因子，其主要功能有从母体通过胎盘向胎儿转运保护性抗体，帮助新生儿从肠道吸收母乳中的抗体，以及在成人体内介导抗体“回收”等。该研究发现，这种对胎儿和婴幼儿起重要作用的免疫因子可以被B族肠道病毒“绑架”，作为其入侵宿主细胞的关键受体。
本研究中，研究人员检测了B族肠道病毒各进化分支中具代表性的17个毒株（分属15个血清型），除Echo 6, Echo 30的两个原型株外，均为我国近年来的流行株。检测发现，除柯萨奇B4，B5之外，其余15个毒株均依赖于FcRn来完成其感染过程，其中包括致病性较强的柯萨奇病毒A9，埃可病毒6，9，11，30等。该研究揭示了FcRn是B族肠道病毒的一个通用受体。
研究发现，与之前报道的埃可病毒表面吸附受体不同（如CD55等），FcRn是一个脱衣壳受体。当病毒颗粒与受体直接结合后，，在生理条件下以及在受体和脂质膜的共同作用下，病毒完成了入侵细胞时必须的脱衣壳过程，最后将遗传物质释放到宿主细胞内。
利用冷冻电镜技术，解析病毒入侵机制
为了进一步阐明病毒和受体的互作机制， 研究人员利用冷冻电镜技术，解析了Echo 6病毒，及Echo 6病毒与其吸附受体CD55的复合物，脱衣壳受体FcRn的复合物，在不同pH条件下的原子/近原子水平高分辨率电镜结构（共7个电镜结构，2.9-3.8 Å）。结果表明，Echo 6及Echo 6-CD55的复合物在中性和酸性pH条件下均稳定。FcRn结合在正二十面体病毒表面由VP1蛋白形成的“峡谷”（Canyon）样结构部位。在酸性条件下，FcRn诱导病毒表面蛋白发生变构，使得峡谷内部维持病毒粒子稳定性的脂类分子（又称“口袋因子”，pocket factor）释放，从而起始脱衣壳和遗传物质释放过程。
本研究首次在近原子水平的病毒-受体复合物结构中捕捉到pocket factor释放的中间态；首次在分子水平清晰展示介导脂类分子转运口袋附近关键氨基酸的构象变化；并首次以原子/近原子水平高分辨率电镜结构，系统阐明了非囊膜病毒入侵过程中“双受体系统”的作用机制。
埃可病毒等B族肠道病毒入侵机制
中科院微生物研究所助理研究员赵欣，北京大学博士后张桂根，中国科学技术大学与中科院微生物研究所联合培养博士生刘升，首都医科大学附属北京儿童医院副研究员陈祥鹏为本文的并列第一作者；高福院士和北京大学魏文胜研究员，首都医科大学附属北京儿童医院谢正德研究员为论文共同通讯作者。
论文通讯作者简介
关于 高福 院士
中国科学院院士，美国科学院院士，病原微生物与免疫学家，“国家杰出青年基金”获得者，“国家973项目”首席科学家。中国科学院微生物研究所研究员，中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室主任，中国科学院大学医学院院长、中国疾病预防控制中心主任、国家自然科学基金委员会副主任。
主要研究方向为病原微生物跨种间传播机制与分子免疫学，主要从事T细胞识别、流感病毒等病毒侵入的分子机制、禽流感等动物源性病原跨种间传播的机制研究等。
关于 魏文胜 研究员
魏文胜，北京大学生物医学前沿创新中心（BIOPIC），北京未来基因诊断高精尖创新中心（ICG），北大-清华生命科学联合中心（CLS），北京大学生命科学学院研究员，北京大学基因组编辑研究中心主任，中国遗传学会基因组编辑分会副主任。
主要研究方向为基因组编辑技术、功能基因组学以及基因治疗；在此基础上研究癌症、感染等重大疾病发生机制，为发展高效治疗手段提供新的药物靶点和思路。
关于 谢正德 研究员
谢正德，研究员，教授，博士生导师。首都医科大学附属北京儿童医院，北京市儿科研究所感染与病毒研究室主任。中华医学会儿科学分会儿科感染学组副组长，儿童感染控制专业委员会副主任委员，医学病毒学分会临床病毒学组副组长。
主要研究方向为儿童呼吸道感染及脑炎脑膜炎病毒病原学及分子流行病学，儿童EB病毒感染及相关疾病。
论文相关信息
论文原文刊载于Cell Press细胞出版社旗下期刊Cell（《细胞》）上，点击“阅读原文”或扫描下方二维码查看论文
论文标题：
Human neonatal Fc receptor is the cellular uncoating receptor for Enterovirus B
论文网址：
https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(19)30454-4
DOI:
https://doi.org/10.1016/j.cell.2019.04.035
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